普鲁士蓝染色简介:
Perls普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁青化钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞内或间质内,主要显示三价铁盐。其染色原理为:三价铁离子被从蛋白质中被稀盐酸分离出来,生成不溶解的蓝色化合物,即普鲁士蓝。
普鲁士蓝染色实验意义:
Perls普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法。
实验步骤:
(1)石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯I 20min-二甲苯II 20min-无水乙醇I 5min-无水乙醇II 5min-75%酒精5min,自来水洗,蒸馏水洗3遍。
(2)普鲁士蓝染色:将亚铁青化钾溶液和盐酸溶液等比例混合成普鲁士蓝染液,切片入染液中染色1h,蒸馏水洗2遍。
(3)核固红染色:核固红染液染色1-5min,流水冲洗。
(4)切片依次放入无水乙醇I 5min-无水乙醇II 5min-无水乙醇III 5min-二甲苯I 5min-二甲苯II5min透明,中性树胶封片。
(5)显微镜镜检,图像采集分析。
实验结果:
铁离子呈蓝色;细胞核呈红色。
实验技巧:
(1)普鲁士蓝染液要现配现用。
(2)切片染色前用蒸馏水洗干净,防止自来水中的铁离子在染色中反应,造成假阳性。
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