Proteomics
Bio-Rad蛋白质组双向电泳实验操作手册 ProteomeWorks TM System
双向电泳实验流程
z样品制备（Sample preparation）
z固相预制胶条的水化（IPG strip rehydration）
z第一向等电聚焦（IEF）
z胶条的平衡（IPG strip equilibration）
z第二向SDS-PAGE电泳（SDS-PAGE electrophresis） z凝胶的染色及检测（Detection/Staining）
z PDQuest软件分析（Software analysis）
z质谱鉴定（Protein identification）
目 录
第一章 实验材料
1．1 IPG预制胶条及载体两性电解质
1．2 蛋白质定量试剂盒及其试剂
1．3 试剂盒及其试剂
1．4 化学试剂
1．5 蛋白质Marker
1．6 染色试剂
1．7 注意事项
第二章 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳 2. 1 溶液的配制
2. 2 SDS-PAGE凝胶的配制
2. 3 操作方法
2. 4 注意事项
第三章 双向电泳
3. 1 溶液配制
3. 2 操作步骤
3. 3 注意事项
附录1 双向电泳完整的操作步骤
附录2 聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配置 附录3 细胞样品的一般处理步骤
附录4 组织样品的一般处理步骤
第一章 实验材料
1．1 IPG预制胶条及载体两性电解质
（一）IPG预制胶条（美国Bio-Rad公司），-20℃冰箱保存
cm 163-2000 IPG预制胶条 pH 3-10，7
，nonlinear（NL） 163-2002
cm
IPG预制胶条 pH 3-10， 7
cm 163-2001 IPG预制胶条 pH 4-7，7
cm 163-2003 IPG预制胶条 pH 3-6，7
cm 163-2004 IPG预制胶条 pH 5-8，7
cm 163-2005 IPG预制胶条 pH 7-10，7
IPG预制胶条 pH 3-10，17cm 163-2007
cm，nonlinear（NL） 163-2009 IPG预制胶条 pH 3-10， 17
IPG预制胶条 pH 4-7，17cm 163-2008 IPG预制胶条 pH 3-6，17cm 163-2010 IPG预制胶条 pH 5-8，17cm 163-2011 IPG预制胶条 pH 7-10，17cm 163-2012 IPG预制胶条 pH 3-10，18cm 163-2032 IPG预制胶条 pH 3-10， 18cm，nonlinear（NL） 163-2033 IPG预制胶条 pH 4-7，18cm 163-2034 IPG预制胶条 pH 3-6，18cm 163-2035 IPG预制胶条 pH 5-8，18cm 163-2036 IPG预制胶条 pH 7-10，18cm 163-2037 IPG预制胶条 pH 3-10，11cm 163-2014 IPG预制胶条 pH 3-10， 11cm，nonlinear（NL） 163-2016 IPG预制胶条 pH 4-7，11cm 163-2015 IPG预制胶条 pH 3-6，11cm 163-2017 IPG预制胶条 pH 5-8，11cm 163-2018 IPG预制胶条 pH 7-10，11cm 163-2019 IPG预制胶条 pH 3.9-5.1，17cm
163-2020
163-2021 IPG预制胶条 pH 4.7-5.9，17cm
IPG预制胶条 pH 5.5-6.7，17cm
163-2022
163-2023 IPG预制胶条 pH 6.3-8.3，17cm
163-2038 IPG预制胶条 pH 3.9-5.1，18cm
163-2039 IPG预制胶条 pH 4.7-5.9，18cm
163-2040 IPG预制胶条 pH 5.5-6.7，18cm
163-2041 IPG预制胶条 pH 6.3-8.3，18cm
163-2024 IPG预制胶条 pH 3.9-5.1，11cm
163-2025 IPG预制胶条 pH 4.7-5.9，11cm
163-2026 IPG预制胶条 pH 5.5-6.7，11cm
163-2027 IPG预制胶条 pH 6.3-8.3，11cm
IPG预制胶条 pH 3.9-5.1，7cm 163-2028 IPG预制胶条 pH 4.7-5.9，7cm 163-2029 IPG预制胶条 pH 5.5-6.7，7cm 163-2030 IPG预制胶条 pH 6.3-8.3，7cm 163-2031 （二）载体两性电解质（美国Bio-Rad公司），4℃冰箱保存Bio-Lyte 3/10 Ampholyte，40%，10ml 163-1112 Bio-Lyte 3/10 Ampholyte，40%，25ml 163-1113 Bio-Lyte 3/5 Ampholyte，20%，10ml 163-1132 Bio-Lyte 4/6 Ampholyte，40%，10ml 163-1142 Bio-Lyte 4/6 Ampholyte，40%，25ml 163-1143 Bio-Lyte 5/7 Ampholyte，40%，10ml 163-1152 Bio-Lyte 5/7 Ampholyte，40%，25ml 163-1153 Bio-Lyte 6/8 Ampholyte，40%，10ml 163-1162 Bio-Lyte 6/8 Ampholyte，40%，25ml 163-1163 Bio-Lyte 7/9 Ampholyte，40%，10ml 163-1172 Bio-Lyte 8/10 Ampholyte，20%，10ml 163-1182 Bio-Lyte 5/8 Ampholyte，40%，10ml 163-1192 Bio-Lyte 5/8 Ampholyte，40%，25ml 163-1193 （三）等电聚焦上样缓冲液（美国Bio-Rad公司），4℃冰箱保存100×ReadyStrip Buffer，for pH 7-10 IPG Strips，1ml 163-2093 Bio-Lyte 3/10 Ampholyte，100×，1ml 163-2094
163-2095 100×ReadyStrip Buffer，for pH 6.8-8.3 IPG Strips，1ml
100×ReadyStrip Buffer，for pH 5.5-6.7 IPG Strips，1ml
163-2096
163-2097 100×ReadyStrip Buffer，for pH 4.7-5.9 IPG Strips，1ml
